Validasi Metode Uji Kafein dalam Minuman Kopi Menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) di PT Saraswanti Indo Genetech Bogor

Abstract

Telah dilakukan uji kesesuaian sistem (UKS) dan validasi metode uji kafein dalam minuman kopi yang mengacu kepada SNI 2983:2004. Validasi kafein dalam minuman kopi ini perlu dilakukan validasi karena merupakan metode baku yang dimodifikasi, modifikasi dilakukan pada pengambilan jumlah sampel, pereaksi dan laju alir yang digunakan. Penelitian ini bertujuan untuk memastikan unjuk kerja dari metode terbukti valid. Parameter yang ditentukan yaitu linieritas, LOD, LOQ, spesifitas, robustnes, presisi, akurasi dan ketidakpastian pengukuran. Sistem KCKT menggunakan detektor PDA pada panjang gelombang 272 nm dan laju alir 0,75 mL/menit, kolom yang digunakan yaitu Reversed phase C 18 dengan volume injeksi 10 μL pada suhu 35˚C, serta jenis elusi isokratik. Hasil UKS untuk parameter %RSD luas area sebesar 0,95% dan retention time sebesar 0,5%, faktor tailing sebesar 1,58 dan theoritical plate sebesar 5428,53, keseluruhan parameter UKS memenuhi batas keberterimaan sehingga sistem KCKT dapat digunakan untuk pengujian. Hasil pengujian yang diperoleh menunjukkan metode dapat digunakan untuk pengujian rutin karena parameter yang ditentukan memenuhi syarat keberterimaan dengan linieritas r = 0,9999, LOD sebesar 0,34 mg/L dengan S/N ≥ 3 dan LOQ sebesar 6,71 mg/L dengan S/N ≥ 10. Spesifitas didapatkan resolusi ˃ 1,5. Robust volume 1 mL, 3 mL, dan 5 mL secara berurutan didapatkan % RSD sebesar 0,89%, 0,92% dan 0,28% untuk meyakinkan apakah hasil Robust volume berbeda nyata atau tidak maka dilakukan uji t, nilai t hitung dari pemipetan sampel 3 mL dan 1 mL sebesar 1,851 dan t tabel sebesar 2,7764 untuk robust volume sampel 3 mL dan 5 mL nilai t hitung sebesar 1,533 dan t tabel sebesar 2,7764. Presisi didapatkan nilai %RSD analis 1 sebesar 0,64% dan analis 2 sebesar 0,99%. Akurasi metode didapatkan hasil % recovery pada spike level konsentrasi 80%, 100%, 120% secara berurutan yaitu 100,56 %, 99,97%, dan 100,37%. Ketidakpastian pengukuran didapatkan hasil 272,88 ± 0,0073.