Deteksi kandungan babi dalam gummy candy menggunakan metode real-time polymerase chain reaction (PCR)

Abstract

fisik sulit dibedakan dari gelatin halal, sementara metode standar (SNI ISO 20224- 3:2021) menargetkan gen ACTB yang rentan gagal terdeteksi akibat degradasi DNApada produk olahan. Gen mitokondria 12S rRNA berpotensi menjadi alternatif karena jumlah salinannya tinggi dan amplikonnya pendek, namun penerapannya pada gummy candy menggunakan Real-Time PCR masih jarang dilaporkan sehingga menjadi dasar penelitian ini. Tujuan: Mengetahui kemampuan metode Real-Time PCR dengan primer spesifik gen mitokondria 12S rRNA dalam mendeteksi dan mengidentifikasi keberadaan DNA babi (porcine) pada produk gummy candy komersial. Metode: Lima sampel gummy candy komersial (G1-G5) diisolasi DNA nya menggunakan kit kolom silika dengan modifikasi preparasi phosphate buffer saline (PBS), lalu diukur konsentrasi dan kemurniannya sebelum dianalisis dengan Real- Time PCR berbasis EvaGreen bertarget gen 12s rRNA. Hasil dievaluasi melalui nilai quantification cycle (Cq) dan melting temperature (Tm), dengan konfirmasi elektroforesis gel agarosa untuk sampel yang belum menunjukkan Tm sesuai kontrol positif daging babi segar. Hasil: Sampel G4 dan G5 negatif sesuai status halal dan komposisinya, sedangkan G1 tidak menunjukkan amplifikasi meski diketahui menggunakan gelatin babi. Sampel G2 dan G3 menunjukkan amplifikasi tanpa Tm sesuai kontrol positif, namun konfirmasi elektroforesis hanya membuktikan DNA babi pada sampel G2, sedangkan status G3 belum dapat dipastikan. Kesimpulan: Metode Real-Time PCR gen 12S rRNA yang dikombinasikan dengan elektroforesis gel agarosa terbukti mampu mendeteksi DNA babi pada gummy candy yang berpotensi sebagai alat verifikasi kehalalan, meski sensitivitas deteksinya pada beberapa sampel, seperti G1, masih perlu dioptimalkan.