Validasi Metode Bioanalisis Parsial Metformin Hidroklorida pada Plasma Manusia dengan Metode UHPLC-DAD

Abstract

Latar belakang: Metformin HCl merupakan antidiabetik oral terapi lini pertama yang umum digunakan dalam pengelolaan diabetes melitus tipe 2 (DMT2) sehingga penting dilakukan pemantauan kadar obat dalam plasma melalui Therapeutic Drug Monitoring (TDM) karena memiliki variabilitas farmakokinetik yang tinggi antarindividu. Metode kromatografi cair dalam studi sebelumnya menunjukkan hasil validasi yang baik, namun masih terbatas dalam kecepatan dan efisiensi analisis. Modifikasi kondisi analisis menggunakan Ultra High Performance Liquid Chromatography (UHPLC) dengan detektor Diode Array Detector (DAD) berpotensi memengaruhi kinerja metode, sehingga diperlukan validasi parsial sesuai panduan FDA tahun 2018. Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan dan memvalidasi metode bioanalisis secara parsial metformin HCl dalam plasma manusia menggunakan UHPLC-DAD. Metode: Analisis validasi dilakukan menggunakan UHPLC-DAD dengan komposisi perbandingan fase gerak buffer fosfat pH 3,7 dan asetonitril (70:30) SLS 0,35 mM, fase diam C18, λ 233 nm. Evaluasi hasil validasi dinilai berdasarkan kriteria dari FDA tahun 2018. Hasil: Metode yang dikembangkan menghasilkan kurva kalibrasi linier pada rentang konsentrasi 0–6 μg/mL (r = 0,9989) dengan nilai LLOQ sebesar 0,18 μg/mL.Parameter akurasi dan presisi mendapatkan hasil %diff dan %CV ≤15% untuk QCL, QCM, dan QCH dan ≤20% untuk LLOQ. Rata-rata %recovery diperoleh sebesar 97,64%. Metode ini menunjukkan hasil yang selektif karena tidak interferensi di waktu retensi analit dan standar internal, serta tidak menunjukkan efek carryover. Kromatogram sampel dari pasien DMT2 memberikan profil kromatogram yang mirip dengan hasil validasi. Kesimpulan: Metode UHPLC-DAD yang dikembangkan dan divalidasi secara parsial telah memenuhi kriteria keberterimaan berdasarkan FDA tahun 2018 sehingga dapat diaplikasikan dalam studi pemodelan farmakokinetik dan farmakodinamik metformin HCl dalam plasma.